GST融合蛋白沉降技術(shù)(GST pull down)是在體外研究蛋白質(zhì)相互作用的常用方法,常用于檢測已知蛋白之間的互作,也可篩選與已知蛋白互作的未知蛋白。
實(shí)驗(yàn)原理
將體外表達(dá)的GST融合蛋白結(jié)合到谷胱甘肽Beads上,再將靶蛋白-GST-Beads和細(xì)胞裂解液孵育,這樣互作蛋白便一起被吸附在Beads上。在洗掉未結(jié)合的蛋白后,用洗脫液將互作蛋白復(fù)合物從Beads洗脫下來,即GST pull down產(chǎn)物。這種互作復(fù)合物既可以用Western Blot檢測已知蛋白,也可用質(zhì)譜鑒定出未知蛋白。
服務(wù)內(nèi)容
邁凱迪生物擁有龐大的碩博團(tuán)隊(duì),憑借豐富的科研經(jīng)驗(yàn),提供成熟的分子互作實(shí)驗(yàn)服務(wù),包括蛋白與蛋白、蛋白與DNA、蛋白與RNA、RNA與RNA等分子間的互作技術(shù),實(shí)驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定可靠。
邁凱迪生物會(huì)根據(jù)客戶需求評估后得到合適的實(shí)驗(yàn)方案,提供完整的售前售后咨詢和建議,客戶可以隨時(shí)咨詢售后服務(wù)。
實(shí)驗(yàn)流程
實(shí)驗(yàn)材料-蛋白提取-孵育-蛋白結(jié)合-洗脫-檢測
實(shí)驗(yàn)周期
(1)驗(yàn)證型實(shí)驗(yàn)4周左右
(2)篩選型實(shí)驗(yàn):5周
實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目
1.誘餌蛋白原核表達(dá)和Western blot檢測
2.GST pull down捕獲誘餌蛋白及其互作蛋白
3.LC-MS/MS檢測及數(shù)據(jù)分析
樣本要求
(1)WB:2-4g/組;3*10e7個(gè)細(xì)胞/組(約3個(gè)10cm皿);50ul菌體沉淀/組。
(2)MS:2-8g/組;5*10e7個(gè)細(xì)胞/組(約5個(gè)10cm皿);100ul菌體沉淀/組。
要求:待測樣品-80℃保存,干冰取樣/運(yùn)輸,至少在送樣前2-3天通知本公司訂單負(fù)責(zé)人。
交付(根據(jù)檢測項(xiàng)目交付)
1.實(shí)驗(yàn)報(bào)告
2.檢測圖
3.互作蛋白篩選結(jié)果
4.生物信息學(xué)分析結(jié)果和報(bào)告
服務(wù)優(yōu)勢
服務(wù)案例豐富;
方案建議中肯,供客戶選擇多;
自有分子及細(xì)胞生物實(shí)驗(yàn)平臺(tái);
自有蛋白質(zhì)組學(xué)平臺(tái);
售后技術(shù)支持服務(wù)完善。