GST融合蛋白沉降技術(GST pull down)是在體外研究蛋白質相互作用的常用方法,常用于檢測已知蛋白之間的互作,也可篩選與已知蛋白互作的未知蛋白。
實驗原理
將體外表達的GST融合蛋白結合到谷胱甘肽Beads上,再將靶蛋白-GST-Beads和細胞裂解液孵育,這樣互作蛋白便一起被吸附在Beads上。在洗掉未結合的蛋白后,用洗脫液將互作蛋白復合物從Beads洗脫下來,即GST pull down產物。這種互作復合物既可以用Western Blot檢測已知蛋白,也可用質譜鑒定出未知蛋白。
服務內容
邁凱迪生物擁有龐大的碩博團隊,憑借豐富的科研經驗,提供成熟的分子互作實驗服務,包括蛋白與蛋白、蛋白與DNA、蛋白與RNA、RNA與RNA等分子間的互作技術,實驗結果穩定可靠。
邁凱迪生物會根據客戶需求評估后得到合適的實驗方案,提供完整的售前售后咨詢和建議,客戶可以隨時咨詢售后服務。
實驗流程
實驗材料-蛋白提取-孵育-蛋白結合-洗脫-檢測
實驗周期
(1)驗證型實驗4周左右
(2)篩選型實驗:5周
實驗項目
1.誘餌蛋白原核表達和Western blot檢測
2.GST pull down捕獲誘餌蛋白及其互作蛋白
3.LC-MS/MS檢測及數據分析
樣本要求
(1)WB:2-4g/組;3*10e7個細胞/組(約3個10cm皿);50ul菌體沉淀/組。
(2)MS:2-8g/組;5*10e7個細胞/組(約5個10cm皿);100ul菌體沉淀/組。
要求:待測樣品-80℃保存,干冰取樣/運輸,至少在送樣前2-3天通知本公司訂單負責人。
交付(根據檢測項目交付)
1.實驗報告
2.檢測圖
3.互作蛋白篩選結果
4.生物信息學分析結果和報告
服務優勢
服務案例豐富;
方案建議中肯,供客戶選擇多;
自有分子及細胞生物實驗平臺;
自有蛋白質組學平臺;
售后技術支持服務完善。