北京邁凱迪生物技術(shù)團(tuán)隊(duì)?wèi){借豐富的實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)和完善的實(shí)驗(yàn)設(shè)備,可以完成各種多肽的修飾。主要包括熒光素修飾、生物素修飾、乙酰化修飾、二硫鍵修飾以及載體蛋白的偶聯(lián)等。邁凱迪生物提供的多肽修飾服務(wù)周期短,3-5天可完成,交付修飾后的檢測(cè)報(bào)告和產(chǎn)品。
1.熒光素標(biāo)記(FITC、5-FAM、Cy系列、TMR、MGTM Fluor)
熒光染料 激發(fā)波長(zhǎng)nm 發(fā)射波長(zhǎng)nm
FITC 494 518
FAM 494 522
Cy系列(Cy3,Cy5,Cy5.5,Cy7)
TMR 560 582
2.生物素標(biāo)記(C端和N端)
生物素(Biotin)是可以利用酶聯(lián)試劑進(jìn)行檢測(cè)的生物標(biāo)記物,帶一個(gè)活性羧基,因此比較適合標(biāo)記在N端,但很多定制合成的多肽只能在C端進(jìn)行標(biāo)記。
3.磷酸化
北京邁凱迪生物可以通過(guò)磷酸化修飾幫助研究磷酸化對(duì)多肽和蛋白結(jié)構(gòu)的影響以及蛋白激酶的作用機(jī)理。
4.酰氨化及乙酰化
如果合成多肽為蛋白質(zhì)的內(nèi)部序列,通過(guò)N端乙酰化或C端酰氨化可以去除多肽電荷使其更接近蛋白質(zhì)天然結(jié)構(gòu),同時(shí)增強(qiáng)了多肽對(duì)外肽酶的防御性。
5.二硫鍵修飾
北京邁凱迪生物可以通過(guò)在半胱氨酸殘基間形成二硫鍵,實(shí)現(xiàn)多肽環(huán)狀,但直接氧化的方法得到的二硫鍵隨機(jī)出現(xiàn),北京邁凱迪生物可以修飾含多個(gè)半胱氨酸殘基的多肽,可以在指定位置構(gòu)建二硫鍵。
6.載體蛋白偶聯(lián)
北京邁凱迪生物利用生物化學(xué)合成方法,可以將小肽段偶聯(lián)到載體蛋白上,從而得到完全抗原,常用的載體蛋白包括(BSA、OVA、KLH、HRP等)KLH一般偶聯(lián)的效果更好一些,因?yàn)樵贓LISA或WB檢測(cè)中沒(méi)有抑制效應(yīng)不會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。常用的偶聯(lián)原理是順丁烯二酰亞胺理論,即將多肽中的半胱氨酸殘基與載體蛋白偶聯(lián)。如果打算合成抗原,建議在末端添加一個(gè)半胱氨酸殘基以便促進(jìn)偶聯(lián)反應(yīng)。