1.服務(wù)簡(jiǎn)介S-004
北京邁凱迪生物提供哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)服務(wù)。哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)在表達(dá)過(guò)程中有翻譯后修飾和折益的功能,這一特點(diǎn)使其蛋白更接近天然蛋白,具備天然蛋白必須的空間結(jié)構(gòu)和修飾,與天然蛋白有相同的生物活性。哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)在功能蛋白、抗體生產(chǎn)、臨床疫苗的研發(fā)和生產(chǎn)中應(yīng)用較多。
2.服務(wù)內(nèi)容
北京邁凱迪生物可提供多種表達(dá)服務(wù),包括瞬時(shí)轉(zhuǎn)染表達(dá)、重組抗體表達(dá)生產(chǎn)、穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建服務(wù)。北京邁凱迪生物提供無(wú)血清懸浮培養(yǎng)的多種哺乳細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng),同時(shí)提供商業(yè)化轉(zhuǎn)染體系為客戶(hù)提供多種選擇;邁凱迪生物擁有一套經(jīng)過(guò)反復(fù)驗(yàn)證的載體-細(xì)胞-轉(zhuǎn)染高效表達(dá)體系,可以輕松獲得抗體的穩(wěn)定性克級(jí)生產(chǎn);可提供蛋白及抗體藥物研發(fā)生產(chǎn)服務(wù)。我們可提供一站式服務(wù),包括基因優(yōu)化(密碼子優(yōu)化)、蛋白結(jié)構(gòu)分析與表達(dá)方案設(shè)計(jì)、瞬時(shí)轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建、重組抗體生產(chǎn)、數(shù)據(jù)分析。
3.實(shí)驗(yàn)原理
構(gòu)建的質(zhì)粒(環(huán)狀質(zhì)粒)導(dǎo)入到培養(yǎng)好的細(xì)胞內(nèi),將構(gòu)建好的質(zhì)粒酶切(質(zhì)粒線(xiàn)性化),線(xiàn)性化后的質(zhì)粒導(dǎo)入到定向馴化培養(yǎng)好的宿主細(xì)胞后,線(xiàn)性化的質(zhì)粒能夠和細(xì)胞自身的基因組整合,隨著細(xì)胞的生長(zhǎng)分裂能夠穩(wěn)定的表達(dá),這個(gè)過(guò)程就叫做穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。因?yàn)橘|(zhì)粒整合到細(xì)胞基因組上是一個(gè)相對(duì)隨機(jī)的過(guò)程(可以人為干預(yù),促進(jìn)其成功率),有的質(zhì)粒未能成功的進(jìn)行同源重組,有的重組成功也不能穩(wěn)定遺傳,且重組后的狀態(tài)也有幾種,因此,在其重組后進(jìn)行不斷的加壓篩選(這就是細(xì)胞系構(gòu)建時(shí)間長(zhǎng)的原因),篩選出能夠穩(wěn)定表達(dá)蛋白的細(xì)胞株,這就是穩(wěn)定細(xì)胞株的篩選。經(jīng)過(guò)成功篩選的細(xì)胞株,直接培養(yǎng)可以大量的生產(chǎn)目的蛋白,雖然前期耗時(shí)較長(zhǎng),但節(jié)約了后續(xù)大規(guī)模培養(yǎng)的時(shí)間。(可以先嘗試瞬時(shí)轉(zhuǎn)染得到少量蛋白,檢測(cè)后再進(jìn)行穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建)。